BioGems試劑級重組人胰島素產(chǎn)品特點
無血清和低血清培養(yǎng)基的必需添加物；
真核細(xì)胞重組表達(dá)，不含動物成分 (Animal Free)；
生物活性與天然蛋白相同，批間穩(wěn)定；
價格優(yōu)勢明顯
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品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 純度 | 規(guī)格 | 價格 |
PeproTech/ BioGems | 10-365-1g | Recombinant Human Insulin 重組人胰島素 | ≥ 95% | 1g/支 | 7000元 |
無血清培養(yǎng)基中應(yīng)該添加試劑級別的重組人胰島素，還是藥物級別的重組人胰島素?
因為胰島素具有治療糖尿病的重要功效，所以多年前就已被制備成藥品，以供糖尿病患
者的使用。
藥品確實具有制備嚴(yán)格(多數(shù)遵循 GMP 標(biāo)準(zhǔn)生產(chǎn))，副作用和安全風(fēng)險小等優(yōu)點，因此
許多無血清培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家傾向于使用藥物級別的胰島素。然而，仍有不少廠家在使用試劑
級別的重組人胰島素來生產(chǎn)無血清培養(yǎng)基。
那么，無血清培養(yǎng)基究竟是該用試劑級別的重組人胰島素，還是藥物級別的重組人胰島
素呢?
表 3：試劑級別和藥物級別重組人胰島素的比較
| 試劑級別重組人胰島素 | 藥物級別重組人胰島素 | |
舉例 | 重組人胰島素 | 優(yōu)泌林 70/30 | 諾和靈 30R |
英文名 | Recombinant Human Insulin | Humulin 70/30 | Novomix30 |
生產(chǎn)廠家 | PeproTech (BioGems) | 禮來(Lilly) | 諾和諾德(Novo Nordisk) |
劑型 | 凍干粉 (不含任何添加物和賦形劑) | 藥用針劑 (液體) | 藥用針劑 (液體) |
儲存條件 | -20°C | 2-8°C | 2-8°C |
表達(dá)細(xì)胞 | 畢赤酵母 | 大腸桿菌 | 釀酒酵母 |
成分 | 重組人胰島素 | 30%重組人胰島素 70%精蛋白鋅重組人胰島素 | 30%可溶性胰島素 70%低精蛋白鋅胰島素 |
輔料 | 無 | 甘油 磷酸氫二鈉 硫酸魚精蛋白 氧化鋅 蒸餾間甲酚(1.6mg/ml) 苯酚(0.65mg/ml) | 甘油 磷酸氫二鈉 硫酸魚精蛋白 氯化鋅 間甲酚(1.6mg/ml) 苯酚(0.65mg/ml) |
藥品與試劑不同，藥品有不同的劑型，如片劑、針劑、膠囊劑和栓劑等十多種。即使對
于同一種劑型，其中還可分為若干亞型，如針劑包括注射水針劑、注射油針劑、中草藥注射
劑，以及注射用滅菌粉末等。而且藥品通常保存于室溫或 2 - 8°C。這就要求藥品在制備過
程中除了包含藥物本身(通常稱為主藥)外，還必須加入一些有助于制劑成型(如賦形劑)、穩(wěn)
定(如抑菌劑)、增溶和助溶等具有不同作用的輔料，也就是說藥品中含有很多非藥品成分。
將藥品添加入無血清培養(yǎng)基中進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時，不可避免地會引入諸多不確定的因素，一方
面可能會對細(xì)胞的生長或分化產(chǎn)生影響，另一方面可能會帶來非預(yù)期的實驗結(jié)果。而藥物輔
料對培養(yǎng)細(xì)胞的作用又很難通過設(shè)立輔料對照來確定，因為輔料的成分過于復(fù)雜，且通常藥
廠并不公開輔料的具體組分。
下面我們以藥物級別的重組人胰島素為例來看一下輔料對體外細(xì)胞培養(yǎng)的可能影響。
表4：藥物級別重組人胰島素中的輔料
輔料 | 輔料在胰島素藥物中的功能 | 輔料對體外細(xì)胞培養(yǎng)的可能作用 |
甘油 | 穩(wěn)定劑，增溶，調(diào)節(jié)滲透壓和表面張力 | 對某些細(xì)胞具有細(xì)胞毒性和影響細(xì)胞 滲透壓的作用[1] |
磷酸氫二鈉 | 調(diào)節(jié) pH 值 | 無 |
硫酸魚精蛋白 | 調(diào)節(jié)胰島素在體內(nèi)的釋放速度(緩釋劑) | 對某些細(xì)胞具有抑制增殖的作用[2] |
氧化鋅 | 沉淀穩(wěn)定劑，促使重組人胰島素形成六 面體的結(jié)晶型沉淀 | 對細(xì)胞具有較強的基因毒性和細(xì)胞毒 性[3]。 |
間甲酚 | 抑菌劑(防腐劑) | 具有細(xì)胞毒性，可致細(xì)胞凋亡和 DNA 損傷[4] 與白蛋白(albumin)和明膠(gelatin) 不兼容，會形成沉淀[5] |
苯酚 | 抑菌劑(防腐劑) |
從上表可以看出，胰島素藥物中的輔料均具有一定的負(fù)面生物學(xué)功能，這些功能在藥物
用于人體內(nèi)治療時不會顯現(xiàn)，因為人體具有肝臟等解毒器官，低濃度的有害物質(zhì)短期內(nèi)不會
對人體的組織產(chǎn)生影響。但當(dāng)藥物用于體外細(xì)胞培養(yǎng)時，因為藥物中的輔料會直接、*地
作用于細(xì)胞，這些輔料的副作用更容易顯現(xiàn)出來。雖然當(dāng)藥物加入細(xì)胞培養(yǎng)體系時，輔料的
濃度可能已經(jīng)降得很低，但不排除這些輔料或多或少仍會對細(xì)胞的生長或分化產(chǎn)生某些影響。
另外，無血清培養(yǎng)基體系中所必須添加的組分-白蛋白(albumin)與胰島素藥物中的輔
料-苯酚和間甲酚會形成沉淀，從而在一定程度上影響白蛋白的功能。其實，已經(jīng)證實苯酚
的衍生物 - 酚紅(phenol red)有干擾某些細(xì)胞的克隆性生長的作用，所以用于培養(yǎng)干細(xì)胞或
生長密度比較低的細(xì)胞的無血清培養(yǎng)基中通常不添加酚紅，盡管培養(yǎng)基中因此會缺少酸堿指
示劑。
綜上所述，配制用于體外細(xì)胞培養(yǎng)的無血清培養(yǎng)基使用不含任何輔料的試劑級別胰
島素，以避免輔料可能給細(xì)胞帶來的危害以及實驗結(jié)果不確定性的增加。
參考文獻(xiàn)
[1] Armitage WJ and Mazur P. Toxic and osmotic effects of glycerol on human granulocytes. Am J
Physiol. 1984;247(5 Pt 1):C382-9.
[2] Leibovich SJ and Polverini PJ. Protamine sulfate inhibition of serum-induced mitogenic responses:
differential effects on normal and neoplastic cells. J Natl Cancer Inst. 1984;73(6):1337-47.
[3] Osman IF, Baumgartner A, et al. Genotoxicity and cytotoxicity of zinc oxide and titanium dioxide in
HEp-2 cells. Nanomedicine (Lond). 2010;5(8):1193-203.
[4] 王源源等。苯酚致 V79 細(xì)胞毒性及 DNA 損傷效應(yīng)的研究。工業(yè)衛(wèi)生與職業(yè)病，2011；(2)：78-81。
[5] Rowe RC, Sheskey PJ, et al. Handbook of Pharmaceutical Excipients (sixth edition).
Pharmaceutical Press. 2009; p485-6.
資料來源：BioGems
BioGems無血清細(xì)胞培養(yǎng)添加物—轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素
白蛋白、胰島素和轉(zhuǎn)鐵蛋白等是無血清培養(yǎng)體系中細(xì)胞生長所必須的因子。
Biogems的人重組轉(zhuǎn)鐵蛋白和胰島素生物活性與天然蛋白相同，批間穩(wěn)定。這些蛋白由真核細(xì)胞重組表達(dá)，不含動物成分。質(zhì)控嚴(yán)格，zui大程度地降低了污染的風(fēng)險。
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品牌 | 貨號 | 產(chǎn)品描述 | 純度 | 規(guī)格 | 價格 |
PeproTech/ BioGems | 10-366-1g | Recombinant Human Transferrin 重組人轉(zhuǎn)鐵蛋白 | ≥ 95% | 1g/支 | 4900元 |
PeproTech/ BioGems | 10-365-1g | Recombinant Human Insulin 重組人胰島素 | ≥ 95% | 1g/支 | 7000元 |
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PeproTech/BioGems | 05121-25-500 | Anti-Human CD3(SAFIRE) | OKT3 | 500ug | 4130元 | 1652元 |
10311-25-500 | Anti-Human CD28(SAFIRE) | CD28.2 | 500ug | 3640元 | 1456元 |
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