凝膠電泳原理
凝膠電泳(英語:Gel electrophoresis)或稱膠體電泳,是一種用于大分子(如DNA、RNA、蛋白質(zhì))以及其碎片的分離、分析技術(shù)。該技術(shù)被科學(xué)工作者用于分離具有不同物理性質(zhì)(大小、電荷、等電點(diǎn))的分子。凝膠電泳通常用于分析用途,但也可以作為預(yù)處理技術(shù),在進(jìn)行質(zhì)譜、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、克隆、DNA測(cè)序或者免疫印跡等檢測(cè)之前,進(jìn)行分子的純化。(維基)
電泳的定義:施加電場(chǎng)后,離子和帶電大分子在基質(zhì)中的運(yùn)動(dòng)。
瓊脂糖和聚丙烯酰胺是蛋白核酸等大分子電泳基質(zhì)。大分子因?yàn)榇笮 ㈦姾珊徒Y(jié)構(gòu)的不同在電泳基質(zhì)中分離。
蛋白分離基礎(chǔ):大小、結(jié)構(gòu)、電荷。
核酸分離基礎(chǔ):主要是大小。堿基組成和序列對(duì)電泳速度影響較小。
在分離蛋白質(zhì)和在分離小核酸時(shí)凝膠通常由不同濃度的丙烯酰胺和交聯(lián)劑聚合而成;分離大一點(diǎn)的核酸時(shí)(長度超過幾百個(gè)堿基),純化的瓊脂更適合作為基質(zhì)。
大分子電泳電學(xué)基礎(chǔ):
歐姆定律:V=IR
W=IV
電泳期間,其中一個(gè)參數(shù)固定,其余兩個(gè)隨著電泳系統(tǒng)電阻的變化而改變。
垂直系統(tǒng)中,導(dǎo)電離子如氯離子電泳出膠后,凝膠電阻會(huì)增加。
水平系統(tǒng)中,電阻變化很小。不過,高壓和增加跑膠長度能降低電阻。
固定不同參數(shù)各有優(yōu)缺點(diǎn)。
測(cè)序凝膠一般固定功率,以保持溫度的一致。
用于蛋白質(zhì)和DNA分離的瓊脂糖和聚丙烯酰胺凝膠一般固定電壓或電流。
Reference
1. Rickwood, D. and Hames, B.D., Gel Electrophoresis of Nucleic Acids: A Practical Approach, IRL Press Limited, 1982.
上海紅榮微再公司在中國代理銷售的LONZA瓊脂糖系列產(chǎn)品是由位于美國Rockland的子公司生產(chǎn),該子公司主要研發(fā)生產(chǎn):分子生物學(xué)和基于細(xì)胞檢測(cè)的生物技術(shù)類產(chǎn)品。分子生物學(xué)產(chǎn)品主要包括DNA/RNA分離、蛋白分離的等電聚焦凝膠電泳類產(chǎn)品;細(xì)胞檢測(cè)類的產(chǎn)品有體外毒理檢測(cè)、藥物篩選研究、細(xì)胞健康檢測(cè);LONZA瓊脂糖粉已經(jīng)成為世界上zui大的瓊脂糖粉生產(chǎn)供應(yīng)商,產(chǎn)品不僅僅應(yīng)用在*范圍內(nèi)的學(xué)術(shù)研究、政府公共研究、生物技術(shù)公司、生物制藥公司,更重要的是現(xiàn)在已經(jīng)成功進(jìn)入個(gè)人護(hù)理、化妝品和醫(yī)療等廣泛的應(yīng)用領(lǐng)域,被譽(yù)為世界上技術(shù)zui高、質(zhì)量的瓊脂糖產(chǎn)品。
LONZA瓊脂糖粉產(chǎn)品系列
在等電聚焦凝膠電泳類產(chǎn)品中,LONZA瓊脂糖粉分為:低熔點(diǎn)瓊脂糖粉(Low Melting Agarose)、高分辨率瓊脂糖粉(High Sieving Agarose)、標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)瓊脂糖粉(Standard Melting Agarose)和其它應(yīng)用瓊脂糖粉。下面為LONZA瓊脂糖粉詳細(xì)介紹:
分子生物學(xué)級(jí)別的瓊脂糖粉:SeaKem LE,SeaPlaque和NuSieve 3:1。
遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別的瓊脂糖粉:SeaKem GTG,SeaPlaque GTG,NuSieve GTG,Seakem Gold和Incert。
LONZA瓊脂糖粉的分類:
①標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn)瓊脂糖粉
SeaKem LE瓊脂糖粉:
屬分子生物學(xué)級(jí)別,是進(jìn)行核酸電泳和印跡分析的理想凝膠。每塊凝膠均能提供清晰的DNA條帶及一致的分辨能力。不含可檢測(cè)到的DNase和RNase活性,具有高強(qiáng)度、低背景等優(yōu)點(diǎn)。因其電滲(EEO)較低,故DNA在凝膠中的遷移速度較快。同時(shí)可在Ouchterlony和放射免疫擴(kuò)散(RID)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行蛋白凝膠電泳。(為保證對(duì)DNA修飾酶產(chǎn)生zui小的抑制作用,特推薦使用SeaKem GTG瓊脂糖,因?yàn)檫@種遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別的瓊脂糖能與限制性消化,DNA連接和克隆等操作中所使用的酶高度兼容。)
SeaKem LE瓊脂糖粉的應(yīng)用:DNA和RNA的電泳和印跡、免疫沉淀。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50001 Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 25g
LONZA 50000 Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 125g
LONZA 50004 Seakem LE Agarose瓊脂糖粉 500g
SeaKem GTG瓊脂糖粉
屬遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別,是標(biāo)準(zhǔn)膠凝溫度,高凝膠強(qiáng)度的瓊脂糖??煞直娲笥?000bp的DNA fragment。主要用于DNA電泳從“SeaKem GTG瓊脂糖”凝膠中回收的DNA可放心的用于限制性消化和連接反應(yīng)。
SeaKem GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用:DNA和RNA回收、DNA和RNA的電泳及印跡。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50071 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 25g
LONZA 50070 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 125g
LONZA 50074 Seakem GTG Agarose瓊脂糖粉 500g
NuSieve 3:1瓊脂糖粉
屬分子生物學(xué)級(jí)別,標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn),用于制備適于鑒定小片段DNA,RNA和≦1kb的PCR產(chǎn)物的高強(qiáng)度凝膠。主要用于分析電泳,以提高跑膠和印跡的速度。其性能檢測(cè)確保10bp-1500bp范圍的DNA fragment均能獲得良好的分辨效果。(如果您需要使用低熔點(diǎn)瓊脂糖,特推薦NuSieve GTG瓊脂糖 產(chǎn)品,研究證實(shí)其適用于那些需要與克隆實(shí)驗(yàn)中所使用的酶*兼容的應(yīng)用。)
NuSieve 3:1瓊脂糖粉的應(yīng)用:小片段DNA和RNA分析,小片段DNA和RNA的Southern blotting和Northern blotting。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50091 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 25g
LONZA 50090 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 125g
LONZA 50094 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 500g
②低熔點(diǎn)瓊脂糖粉
SeaPlaque瓊脂糖粉:
屬分子生物學(xué)級(jí)別,是一種低熔點(diǎn)瓊脂糖,所制凝膠具有更高的篩過特性,更透明。是理想的DNA和RNA電泳產(chǎn)品,也適合組織培養(yǎng)細(xì)胞的克隆和病毒空斑分析。
為保證在凝膠中進(jìn)行的DNA酶反應(yīng)不受影響,特推薦使用SeaPlaque GTG瓊脂糖,這種瓊脂糖已被證明其對(duì)一些常規(guī)性的用于膠內(nèi)操作(如限制型消化,克?。┑拿革@示出zui小的抑制作用。DNase和RNase活性未檢測(cè)到。
SeaPlaque瓊脂糖粉的應(yīng)用:DNA和RNA電泳、病毒空斑檢測(cè)、細(xì)胞培養(yǎng)細(xì)胞的克隆。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50101 SeaPlaque AGAROSE瓊脂糖粉 25G
LONZA 50100 SeaPlaque AGAROSE瓊脂糖粉 125G
SeaPlaque GTG瓊脂糖粉
屬遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別,用于分離大于1000bp的DNA和PCR產(chǎn)物片段。這種低熔點(diǎn)瓊脂糖zui適于直接對(duì)重熔瓊脂糖中的核酸進(jìn)行酶學(xué)操作,而無需額外的DNA純化步驟;也適合在重熔瓊脂糖凝膠中進(jìn)行PCR及測(cè)序反應(yīng)。
SeaPlaque GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用:大片段DNA的分析和回收、凝膠內(nèi)PCR反應(yīng)(In-gelPCR)、凝膠內(nèi)(In-gel)連接和轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)、DNA和RNA的消化。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50111 SeaPlaque GTG AGAROSE瓊脂糖粉 25G
LONZA 50110 SeaPlaque GTG AGAROSE瓊脂糖粉 125G
SeaPrep瓊脂糖粉
是一種*的“軟瓊脂糖”,具有超低的膠凝及熔化溫度。用于雜交瘤克隆及制造軟的,高純度凝膠。它以一種嚴(yán)格的具有代表性的模式擴(kuò)增cDNA文庫,減少在擴(kuò)增的過程中由于不同復(fù)制率所引起的低豐度克隆丟失的可能性。
SeaPrep瓊脂糖粉的應(yīng)用:細(xì)胞培養(yǎng)、雜交瘤克隆、封裝/包埋細(xì)胞。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50302 SeaPrep Agarose瓊脂糖粉 25g
NuSieve GTG瓊脂糖粉
屬遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別,低熔點(diǎn),能有效的分辨10bp-1000bp的DNA fragment, PCR和RT-PCR產(chǎn)物;使用該瓊脂糖制備凝膠不僅易于操作并且可保證不同批次產(chǎn)品間一致的電泳遷移速度,可直接在重熔NuSieve GTG瓊脂糖中進(jìn)行克隆操作,無需DNA的抽提步驟。這種瓊脂糖也適用于各種需在重熔瓊脂糖凝膠中進(jìn)行的反應(yīng)。該產(chǎn)品經(jīng)檢測(cè)并證實(shí)能夠支持在重熔瓊脂糖凝膠中直接進(jìn)行DNA連接和轉(zhuǎn)化。
NuSieve GTG瓊脂糖粉的應(yīng)用:小片段DNA的分析和回收、凝膠內(nèi)PCR反應(yīng)(In-gelPCR)凝膠內(nèi)(In-gel)連接和轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50081 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 25g
LONZA 50080 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 125g
LONZA 50084 NuSieve GTG Agarose瓊脂糖粉 500g
③高分辨率瓊脂糖粉
MetaPhor瓊脂糖粉
是一種中熔點(diǎn)瓊脂糖,提供兩倍于的篩過瓊脂糖產(chǎn)品的分辨能力。MetaPhor瓊脂糖可用于水平凝膠電泳分辨20bp-800bp的DNA fragment,PCR和RT-PCR產(chǎn)物,分辨能力約為DNA fragment大小的2%。MetaPhor瓊脂糖凝膠(2%-4%)與聚丙烯酰胺凝膠(4%-8%)的分辨率接近。這些凝膠zui適于分辨AMPFLPs,STRs,三核苷酸和四核苷酸重復(fù)序列。
MetaPhor瓊脂糖粉的應(yīng)用:小片段PCR產(chǎn)物分析、STR分析、RT-PCR。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50181 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 25g
LONZA 50180 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 125g
LONZA 50184 MetaPhor Agarose瓊脂糖粉 500g
NuSieve 3:1瓊脂糖粉
屬分子生物學(xué)級(jí)別,標(biāo)準(zhǔn)熔點(diǎn),用于制備適于鑒定小片段DNA,RNA和≦1kb的PCR產(chǎn)物的高強(qiáng)度凝膠。主要用于分析電泳,以提高跑膠和印跡的速度。其性能檢測(cè)確保10bp-1500bp范圍的DNA fragment均能獲得良好的分辨效果。(如果您需要使用低熔點(diǎn)瓊脂糖,特推薦NuSieve GTG瓊脂糖 產(chǎn)品,研究證實(shí)其適用于那些需要與克隆實(shí)驗(yàn)中所使用的酶*兼容的應(yīng)用。)
NuSieve 3:1瓊脂糖粉的應(yīng)用:小片段DNA和RNA分析、RT-PCR,小片段DNA和RNA的Southern blotting和Northern blotting。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50091 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 25g
LONZA 50090 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 125g
LONZA 50094 NuSieve 3:1 Agarose瓊脂糖粉 500g
④Identity瓊脂糖粉
I.D.NA瓊脂糖粉
是一種高強(qiáng)度的低滲瓊脂糖,用于在DNA鑒定測(cè)試中保證DNA分辨能力的一致性。經(jīng)證實(shí),在DNA鑒定實(shí)驗(yàn)條件下可獲得區(qū)分VNTRs,HVRs,RFLPs及DNA大小標(biāo)準(zhǔn)物所需的清晰明亮的DNA條帶。這種瓊脂糖顯示出較高的印跡DNA轉(zhuǎn)移效率和DNA圖譜分析所需的不同批號(hào)產(chǎn)品的一致性。
I.D.NA瓊脂糖粉的應(yīng)用:DNA鑒定測(cè)試。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50121 InCert Agarose瓊脂糖粉 1g
LONZA 50123 InCert Agarose瓊脂糖粉 5g
⑤高純度瓊脂糖粉
IsoGel瓊脂糖粉
于等電聚焦電泳(IEF),減少靜息的陽離子及運(yùn)動(dòng)陽離子的制造程序使之具有檢測(cè)不到的EEO。除了能灌制垂直及水平的薄膠外,還具有足夠的強(qiáng)度用于在垂直管內(nèi)制膠。
IsoGel瓊脂糖粉的應(yīng)用:等電聚焦電泳。
廠家品牌 貨號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝規(guī)格
LONZA 50202 Iso Gel Agarose瓊脂糖粉 25g
大量現(xiàn)貨
LONZA SeaKem® Gold Agarose金瓊脂糖粉,超長DNA凝膠電泳
產(chǎn)品英文名 SeaKem® Gold Agarose
產(chǎn)品中文名 SeaKem®金瓊脂糖粉
適用:長片段及超長片段DNA跑膠
SeaKem® Gold Agarose是一種高凝膠強(qiáng)度,低EEO(電滲),標(biāo)準(zhǔn)凝膠溫度的瓊脂糖。這種遺傳學(xué)技術(shù)級(jí)別(Genetic Technology Grade™ Agarose)的瓊脂糖zui適于在脈沖場(chǎng)凝膠電泳法(pulsed field gel electrophoresis-PFGE)實(shí)驗(yàn)中快速分辨巨大堿基對(duì)DNA:長片段及超長片段DNA。由于SeaKem®Gold Agarose金膠瓊脂糖的低EEO特性,在SeaKem®Gold瓊脂糖凝膠電泳實(shí)驗(yàn)中,DNA電泳遷移率遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過傳統(tǒng)的瓊脂糖凝膠電泳。PFGE的跑膠時(shí)間依使用的緩沖液和瓊脂糖濃度的不同可減少至原電泳時(shí)間的50%。因其高凝膠強(qiáng)度,即使是使用低濃度(0.5%的SeaKem Gold瓊脂糖凝膠),操作處理依然很方便,從而允許在常規(guī)電泳中分離更大的DNA fragment并減少PFGE中的DNA分離的耗時(shí)。為了更好的在PFGE電泳后對(duì)大片段DNA fragment回收,推薦使用 SeaPlaque™ GTG™ Agarose和ß-Agarase。
品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 包裝 | 目錄價(jià) |
LONZA | 50152 | SeaKem® Gold Agarose 金瓊脂糖粉 25g | 25g/瓶 | 3220元 |
LONZA | 50150 | SeaKem® Gold Agarose 金瓊脂糖粉125g | 125g/瓶 | 11870元 |
更多瓊脂及電泳基質(zhì)產(chǎn)品信息華雅再生醫(yī)學(xué)旗艦公司:紅榮微再(上海)生物工程技術(shù)有限公司 :1500 1904 520。紅榮微再-客服: 2395557778 經(jīng)銷商專員。紅榮微再以“傳遞科學(xué)價(jià)值,服務(wù)科學(xué)研究”為宗旨,主營干細(xì)胞、醫(yī)療、細(xì)胞治療、器官再生四大板塊的產(chǎn)品。