單細胞起始的DNA測序文庫構建 | ||||||||||||
PicoPLEX® Gold Single Cell DNA-Seq Kit | ||||||||||||
· 高重現(xiàn)性和準確性:可用于CNV、SNV和非整倍體檢測 · 在SNV和CNV檢測方面優(yōu)于MDA技術 · 三小時的工作流程,手動操作時間不到30分鐘 · 均勻的高覆蓋率,低的等位基因插入率和脫扣率 | ||||||||||||
■ 應用: | ||||||||||||
適用于以下細胞類型的文庫制備: | ||||||||||||
· 癌癥研究:循環(huán)腫瘤細胞(CTC),激光捕獲顯微切割(LCM)細胞或DNA, 以及細針抽吸(FNA)細胞; · 生殖健康研究:胚胎細胞和循環(huán)胎兒細胞; · 發(fā)育生物學:胚胎細胞,干細胞和稀有細胞; · 宏基因組學和微生物學:微生物細胞,微生物組和環(huán)境樣品。 | ||||||||||||
■ 產品說明: | ||||||||||||
PicoPLEX Gold Single Cell DNA-Seq Kit | ||||||||||||
PicoPLEX Gold Single Cell DNA-Seq Kit (PicoPLEX Gold) 是一種旨在從單細胞中生成高質量的DNA文庫,以便在Illumina平臺進行測序的試劑盒。該試劑盒基于PicoPLEX技術,優(yōu)化用于檢測拷貝數(shù)變異 (CNVs)、單核苷酸變異 (SNVs)、插入缺失 (indels) 和結構變異 (SV)。PicoPLEX Gold kit在SNV檢測中表現(xiàn)出比MDA技術更好的性能。 PicoPLEX Gold Single Cell DNA-Seq Kit不包含index。兼容的 Index如下所述,需要單獨購買。 PicoPLEX WGA是一種被廣泛用于檢測單細胞中CNV的全基因組擴增(WGA)技術。初,PicoPLEX技術主要用于高再現(xiàn)性的檢測非整倍體異倍性和CNV。為了滿足準確檢測SNV的需求,對PicoPLEX WGA技術中的酶、引物和protocols進行了進一步優(yōu)化,不僅提升了擴增的覆蓋度、一致性、準確性,同時提高了CNV、SNV、Indel和其他SV的分辨率,并且保持了高重現(xiàn)性。 PicoPLEX Gold Single Cell DNA-Seq Kit可以固定細胞或非固定細胞起始,只需簡單的4步操作流程,即可在3小時內完成Illumina NGS文庫的構建,且手動操作時間非常短。 | ||||||||||||
DNA HT dual index kits | ||||||||||||
DNA HT dual index kits是與 ThruPLEX或 PicoPLEX文庫制備試劑盒搭配使用,用以構建Illumina測序文庫的index引物試劑盒。這些試劑盒包含Illumina Nextera® XT v2 index序列對應的index引物,多可提供384種不同的雙端index,用于樣本混合測序時的區(qū)分。其中index引物預先分裝在4個的不同條形碼標記的index微孔板中,每個微孔板可提供不同的96種index組合 (Code No.R400660-R400663),index微孔板(96N Sets A-D)的每個孔提供的量足夠進行一次測序反應;另一種是一套中有24個單獨的反應管,每個反應管中包含不同的雙端index組合(Code No.R400664),且每個反應管(24N)提供的量足夠進行兩次測序反應。 | ||||||||||||
DNA unique dual index kits | ||||||||||||
DNA unique dual index kits是與 ThruPLEX或 PicoPLEX文庫制備試劑盒搭配使用,用以構建Illumina測序文庫的index引物試劑盒。這些試劑盒包含“IDT for Illumina UD”對應的index引物,多可提供96種不同雙端index,用于樣本混合測序時的區(qū)分。index引物預先分裝在不同的4組各24個單獨的管中,其中每組可提供24種不同index引物組合(Code No.R400665-R400668)。每個index引物管(24U Sets A-D)提供的量足夠進行兩次測序反應。 | ||||||||||||
DNA single index kits | ||||||||||||
DNA single index kits是與 ThruPLEX或 PicoPLEX文庫制備試劑盒搭配使用,用以構建Illumina測序文庫的index引物試劑盒。這些試劑盒包含與“TruSeq LT set A”序列對應的index引物,可提供24種單端index,用于樣本混合測序時的區(qū)分。index引物預先分裝在不同的2組各12個單獨的管中,其中每組可提供12種不同index引物組合(Code No.R400695和R400697)。每個index引物管(12U Sets A-B)提供的量足夠進行8次測序反應。 | ||||||||||||
圖1. PicoPLEX Gold Single Cell DNA-Seq Kit技術。 PicoPLEX Gold的技術概要。通過step1裂解細胞獲得gDNA,通過隨機引物進行預擴增 (step 2),然后進行指數(shù)擴增得到測序文庫(step 4)。 | ||||||||||||
圖2. PicoPLEX Gold的主要特點:高覆蓋度,高均勻性,和高重現(xiàn)性 (與A產品技術相比)。 Panel A. 圖中顯示在不同深度的測序中覆蓋的堿基數(shù) (~35M read pairs,PE 2 × 150 bp) 。PicoPLEX Gold在較低深度的覆蓋度與A產品 (MDA) 相似,在較高深度的覆蓋度高于A產品(MDA)。 Panel B. 以gDNA樣本 (NA12878) 和單細胞樣本 (GM12878) 起始,使用PicoPLEX Gold和A產品進行全基因組擴增。相比較于MDA,PicoPLEX Gold顯示出更均勻的覆蓋度。 Panel C. 評估覆蓋度的重現(xiàn)性。與A產品 (右) 相比,PicoPLEX Gold (左) 的在兩個單細胞群之間的一致性明顯更好。 | ||||||||||||
圖3. 使用PicoPLEX Gold進行高質量單核苷酸變異(SNV)檢測。 產品訂購信息:
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