在使用人外周血淋巴細(xì)胞分離液時有哪些注意事項呢
更新時間：2022-01-20 點(diǎn)擊次數(shù)：1363次
人外周血淋巴細(xì)胞分離液嚴(yán)格無菌、無毒、極低內(nèi)毒素、不影響細(xì)胞生物學(xué)功能，人外周血淋巴細(xì)胞分離液主要用于分離人外周血淋巴細(xì)胞的分離，也適用于大多數(shù)哺乳動物單個核細(xì)胞的分離。
下面讓我們一起來了解一下人外周血淋巴細(xì)胞分離液操作技術(shù)相關(guān)的注意事項：
?、?嚴(yán)格按照人外周血淋巴細(xì)胞分離液試劑盒說明書進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30～60min。
?、?加樣后及時放人孵箱。標(biāo)本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍，難以清洗*。
(3)封板溫育時，各孔一定要封嚴(yán)，防止陽性標(biāo)本的液體蒸發(fā)，產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機(jī)洗板時，保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干：還要防止針口有纖維蛋白或異物，這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導(dǎo)致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測量，以免反應(yīng)板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標(biāo)板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍(lán)色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械。加終止液時應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。
(9)應(yīng)保證C清潔，整個操作過程中保證酶標(biāo)板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準(zhǔn)確、可靠的實驗結(jié)果。
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