人類血液是分子信息的豐富來(lái)源,可用于開發(fā)特定腫瘤和器官(例如胎盤)的非侵入性液體活檢,以預(yù)測(cè)疾病、其進(jìn)展和對(duì)治療的反應(yīng)。近年來(lái),隨著微陣列和RNA測(cè)序(RNA-Seq)等技術(shù)的普及,全基因組轉(zhuǎn)錄組分析被應(yīng)用于發(fā)現(xiàn)分子標(biāo)記,這些技術(shù)允許同時(shí)測(cè)量數(shù)以萬(wàn)計(jì)的蛋白質(zhì)編碼和非蛋白質(zhì)。開發(fā)血液轉(zhuǎn)錄組標(biāo)記物以監(jiān)測(cè)整個(gè)懷孕期間的胎盤功能和產(chǎn)科并發(fā)癥的風(fēng)險(xiǎn)需要準(zhǔn)確量化基因表達(dá)。
來(lái)自美國(guó)韋恩大學(xué)醫(yī)學(xué)院和密歇根州立大學(xué)的研究團(tuán)隊(duì)在Nature子刊Scientific Reports發(fā)表了題為“Targeted expression profiling by RNA - Seq improves detection of cellular dynamics during pregnancy and identifies a role for T cells in term parturition"的文章,比較了在外顯子水平探測(cè)轉(zhuǎn)錄組的Affymetrix人類轉(zhuǎn)錄組陣列(HTA 2.0)、具有珠蛋白還原的配對(duì)末端Illumina RNA-Seq以及一種新型全基因組靶向表達(dá)分析技術(shù) DriverMap,評(píng)估了這些方法在母體全血中定量源自胎盤單細(xì)胞基因組的細(xì)胞類型特異性特征表達(dá)的能力,并確定了這些特征是否能表明足月分娩。
由于器官和/或細(xì)胞類型特異性轉(zhuǎn)錄本在全血中低表達(dá),因此RNA的完整性、穩(wěn)定性和RNA的豐度定量對(duì)下游實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要。本研究中使用的血液RNA采血管是PAXgene全血RNA管(BD,762165),該管中含有穩(wěn)定添加劑,可長(zhǎng)時(shí)間維持細(xì)胞 RNA 完整性。