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康為世紀(jì) Bacteria Genomic DNA提取試劑
產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) Bacteria Genomic DNA提取試劑產(chǎn)品貨號(hào):CW0552S英文名稱:Bacteria Genomic DNA Kit產(chǎn)品規(guī)格:50 preps
產(chǎn)品介紹:
本試劑盒適用于從革蘭氏陰性菌、革蘭氏陽(yáng)性菌中提取高純度總DNA,每次可處理106-108個(gè)細(xì)胞,獲得多至20 μg的總DNA。純化過(guò)程中不需苯酚或氯仿等有毒溶劑,無(wú)需乙醇沉淀,一小時(shí)內(nèi)即可獲得高純度DNA。本試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系使裂解液中的DNA高效特異的結(jié)合到硅基質(zhì)離心吸附柱上,而其他污染物可流過(guò)膜,PCR和其他酶促反應(yīng)的抑制劑可通過(guò)兩步洗滌步驟被有效去除,最后使用低鹽緩沖液或水洗脫,即可獲得高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-TimePCR、文庫(kù)構(gòu)建、Southern Blot、分子標(biāo)記等下游實(shí)驗(yàn)。
產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) Bacteria Genomic DNA提取試劑
產(chǎn)品貨號(hào):CW0552S
產(chǎn)品組份:
產(chǎn)品使用說(shuō)明:
實(shí)驗(yàn)步驟:
以革蘭氏陰性菌基因組DNA的提取為例
1.取細(xì)菌培養(yǎng)物1-5 ml(106-108個(gè)細(xì)胞,最多不超過(guò)2×109個(gè)細(xì)胞)置于離心管(自備)中,12,000 rpm(~13,400×g)離心1分鐘,盡量吸凈上清。
2.向沉淀中加入180 μl Buffer GTL,振蕩使菌體重懸。
3.加入20 μl Proteinase K,渦旋混勻,56℃孵育,直至溶液變清亮,孵育過(guò)程中每隔一段時(shí)間顛倒或震蕩離心管使樣本分散。
4.加入200 μl Buffer GL,渦旋震蕩充分混勻。加200 μl無(wú)水乙醇,渦旋震蕩充分混勻。短暫離心,使管壁上的溶液收集到管底。
5.將步驟4所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已裝入收集管的吸附柱(Spin
Columns DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次轉(zhuǎn)入。12,000 rpm離心1分鐘,棄廢液,將吸附柱放回收集管中。
6.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
7.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱放回收集管中。
8.12,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘,以*晾干。
9.將吸附柱置于一個(gè)新的離心管中,向吸附柱的中間部位懸空加入50-200 μl Buffer
GE,室溫放置2-5分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
以革蘭氏陽(yáng)性菌基因組DNA的提取為例
1.取細(xì)菌培養(yǎng)物1-5 ml(106-108個(gè)細(xì)胞,最多不超過(guò)2×109
個(gè)細(xì)胞)置于離心管(自備)中,12,000 rpm(~13,400×g)離心1分鐘,盡量吸凈上清。
2.加入180 μl Enzymatic Lysis Buffer(自備)使菌體重懸。
3.37℃孵育30分鐘。
4.加入20 μl Proteinase K渦旋震蕩,充分混勻。加入200 μl Buffer GL,渦旋震蕩混勻。
5.56℃孵育30分鐘。
2)如需去除RNA,可在上述步驟完成后,加入4 μl濃度為100 mg/ml的RNase A溶液(貨號(hào):CW0601S),震蕩混勻,室溫放置5-10分鐘。
6.加入200 μl無(wú)水乙醇,渦旋震蕩充分混勻。
7.將步驟6所得溶液(包括形成的沉淀)全部加入到已裝入收集管的吸附柱(Spin
Columns DM),若一次不能加完溶液,可分多次轉(zhuǎn)入。12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
8.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
9.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無(wú)水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。
10.12,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中的廢液。將吸附柱置于室溫?cái)?shù)分鐘*晾干。
11.將吸附柱置于一個(gè)新離心管(自備)中,向吸附柱中間部位懸空加入50-200 μl Buffer GE,室溫放置2-5分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
儲(chǔ)存與運(yùn)輸:
室溫(15-30℃)
產(chǎn)品訂購(gòu)信息:
品牌 貨號(hào) 名稱 規(guī)格
康為世紀(jì) CW0552M Bacteria Genomic DNA Kit 200 preps
產(chǎn)品名稱:康為世紀(jì) Bacteria Genomic DNA提取試劑
產(chǎn)品貨號(hào):CW0552S
關(guān)于公司:
康為世紀(jì)生物科技股份有限公司是一家立足于生命科學(xué)領(lǐng)域,有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的國(guó)家優(yōu)良企業(yè),主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn),為生命科學(xué)研究、基因檢測(cè)和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務(wù)。公司曾先后被評(píng)為國(guó)家優(yōu)良企業(yè)、江蘇省科技型中小企業(yè)、江蘇省瞪羚企業(yè)、江蘇省民營(yíng)科技企業(yè)。公司建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺(tái),構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。
產(chǎn)品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護(hù)劑、分子診斷檢測(cè)試劑等,打破了中國(guó)生物研究與產(chǎn)業(yè)對(duì)進(jìn)口試劑的依賴。
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