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看完本篇你就知道什么是無血清細胞凍存液了
更新時間:2023-01-11 點擊次數(shù):569次
目前,細胞凍存常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。
如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結構紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結構成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。
胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。
因此,細胞冷凍技術的關鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。 通常采用甘油或二甲基亞砜(DMSO)作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。
B對于藥用級、或者免疫細胞等特殊場合的研究中,采用甘油或二甲基亞砜(DMSO)作保護劑可能任然不能使用條件:
無血清細胞凍存液,通用于人和各種動物細胞株。特別配方(主要成分為DMSO和氨基酸)具有有效提高細胞凍存活率和復蘇活力。不含動物來源性蛋白,能減少各類病毒、霉菌和支原體等的污染,確保凍存細胞安全。既適用于一般培養(yǎng)細胞的凍存,也適用于無血清培養(yǎng)細胞和蛋白表達細胞的凍存。
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